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    高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)说明书

    阅读次数:1633  发布时间:2022/9/14 10:22:18
     产品简介:

    红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz 小体等检测,  高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用 Schumm 法,其检测原理是在有足够的NADPH 存在下,高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白,当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的 NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内 G6PD 含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原,高铁血红蛋白呈褐色,用分光光度计在 635nm 波长处检测。该试剂盒仅用于科研域,不适用于临床诊断或其他用途。
    产品组成: 
       

    名称

    规格

    50T

    Storage

    试剂(A): 抗凝剂

    5ml

    4℃

    试剂(B): Hb Assay Buffer

    1.5ml

    4℃

    试剂(C): Hb 显色液

    1.5ml

    4℃ 避 光

    试剂(D): G6PD Buffer

    100ml

    4℃

    使用说明书

    1 份


    自备材料:

    1、离心管或试管

    2、水浴锅或恒温箱

    3、比色杯

    4、分光光度计

    操作步骤(仅供参考)

    1、取新鲜静脉血 0.9ml,加入抗凝剂 0.1ml,充分混匀。

    2、低速离心 15min,取出,调整血细胞与血浆比例为 1:1 后再混匀。

    3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 显色液各 0.025ml,颠倒混匀 15 次,使与氧气充分接触,加塞或密封后放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。混匀, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。

    上述操作,可见下表:

    加入物(ml)

    空白管

    测定管

    抗凝血

    0.5

    0.5

    Hb Assay Buffer

    0.025

    Hb 显色液

    0.025

    0.025

    混匀,放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。

    取上述反应液

    0.02

    0.02

    G6PD Buffer

    2

    2


    4混匀,室温放置 2min,比色杯光径 1cm,用分光光度计 635nm 处测定空白管和测定管吸光度,分别命名为 SA  B。

    5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混匀,室温放置 5min,再次用分光光度计

    635nm 处测定空白管吸光度命名为 ST

     

    计算:高铁血红蛋白还原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 参考区间:一般应超过 75%

    注意事项:

    1、 红细胞比容低于 30%时,高铁血红蛋白还原率显著下降,需调整红细胞与血浆的比例。

    2、 样本不应有凝血或溶血,以免影响测定。

    3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

    有效期:6 个月有效。

     

    原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司


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