石蜡切片特恩布尔（TURNBULL）铁（二价）染色试剂盒产品说明书

石蜡切片特恩布尔（TURNBULL）铁（二价）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和氰正铁酸盐结合反应技术，分析存档中的石蜡包埋的组织切片中二价亚铁离子（ferrous ion）沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良TURNBULL方法、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的二价亚铁离子检测。广泛用于血液细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

二价铁（ferrous）是氧化数为二的铁。二价铁溶解性好，生物学效价优于三价铁，因此铁先应被还原为二价铁，才容易被生物体吸收利用。动物和人体的整个消化道都可以吸收，植物在根尖处吸收。机体大约有三分之二的铁存在于红细胞的血红蛋白和肌肉的肌红蛋白中，20％的铁以不同形式存在于肝、脾和其他组织中。铁作为氧的载体，组织内氧的正常输送，在细胞生物氧化和能量代谢过程中发挥着重要作用。 通过酸性氰正铁酸盐（ferricyanide）与组织中二价正铁离子（ferrous ion）结合，成为铁氰亚铁（ferrous ferricyanide），而呈现不溶性亮蓝色色素，又称为特恩布尔蓝或腾氏蓝（turnbull blue）。其反应原理如下：

产品内容

去石蜡液（Reagent A）      毫升

补水液A（Reagent B） 毫升

补水液B（Reagent C） 毫升

补水液C（Reagent D） 毫升

补水液D（Reagent E） 毫升

清理液（Reagent F） 毫升

染色液（Reagent G） 毫升

酸性液（Reagent H） 毫升

饱和液（Reagent I） 毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent G），避免光照；染色液（Reagent G）和酸性液（Reagent H）具有腐蚀性和毒性，注意操作安全；有效期6月

用户自备

2毫升离心管：用于染色工作液配制的容器

核固红复染试剂盒（GMS40011）：用于常规染色后复染

小型染色缸：用于石蜡切片的去石蜡和染色操作

光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析

实验步骤

一、 去石蜡处理

取出10片待测的石蜡包埋的5微米厚的组织切片（注意：石蜡包埋，组织切片须用10％甲醛4℃条一、 样本染色处理

操作开始，将4℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent G）和酸性液（Reagent H）置于室温下，分别移出1毫升到2.2毫升离心管，混匀后，标记为染色工作液，用锡箔纸包裹，避免光照。然后进行下列操作。

1． 小心加上xx微升染色工作液，铺满整个切片样品表面

2． 室温下孵育60分钟；或直至可见篮色

3． 小心移去切片上的染色工作液

4． 小心加上xx微升饱和液（Reagent I），清洗样品表面

5． 小心移去切片上的饱和液（Reagent I） 

三、样本复染处理

1． （选择步骤）样本复染处理（核固红）

2． 小心加上xx微升补水液B（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面

3． 小心移去切片上的补水液B（Reagent C）

4． 小心加上xx微升补水液A（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面

5． 小心移去切片上的补水液A（Reagent B）

6． 小心加上xx微升去石蜡液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面

7． 小心移去切片上的去石蜡液（Reagent A）

8． 放上盖玻片或封片

9． 即刻在一般光学显微镜下观察：二价铁沉积阳性细胞呈现亮蓝色（如果复染：细胞质呈现粉红色，细胞核呈现红色）

注意事项

1． 本产品为50次操作

2． 本产品可以用来鉴别组织或细胞中出现黄棕色的色素是属于那一种，如是含铁血黄素，可证明是何价位的铁离子，如肺郁血、出血、陈旧的出血灶、肝硬化时慢性脾郁血、硬化性血管瘤、动脉瘤性骨囊肿、绒毛血素滑膜炎等

3． 操作时，须戴手套和防护面罩

4． 建议在通风柜里操作

5． 所有操作在室温下进行

6． 染色液（Reagent G）和酸性液（Reagent H）具有腐蚀性和毒性，注意操作安全

7． 石蜡包埋，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，否则造成样品支离破碎

8． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干。空气中晾干状态为没有水滴，呈湿润状态，可见反光

9． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面

10． 样品染色避免过度，肉眼可见蓝色即可终止染色

11． 建议使用核固红复染试剂盒（GMS40011）

12． 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 

13． 本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定显色清晰

使用

秉着“信誉至上、客户满意、质量”的宗旨为我们的用户提供产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售已作严格的质量鉴定，说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

原创作者：青岛捷世康生物科技有限公司