| 主要用途 冰冻切片细胞色素C氧化酶和琥珀酸脱氢酶（Combined COX-SDH）双酶活性染色试剂是一种旨在使用细胞色素C催化人工电子供体染料二氨基联苯胺的非酶源性自然氧化，形成棕褐色不溶性产物，以及使用合成电子受体四氮唑兰染料，通过反应呈现出蓝色沉淀现象，来分析冰冻组织样品中细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶双酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻动物组织的细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性的定性检测。适宜于线粒体疾病和肌肉分型的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
保存方式 保存染色液A和B（Reagent B和D）和反应液A和B（Reagent C和E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效期 6月 用户自备 培养箱：用于反应孵育 中性树脂：用于切片封片 光学显微镜：用于切片染色后观察分析 实验步骤 染色开始，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化；移取2.5毫升染色液A（Reagent B）到1瓶反应液A（Reagent C）里，混匀，标记为反应工作液A，置于冰槽里，避免光照；同时移取1毫升反应液B1（Reagent E1）到1管反应液B2（Reagent E2），混匀，标记为反应工作液B，置于冰槽里，避免光照；然后移取900微升染色液B（Reagent D）到新的1.5毫升离心管，加入100微升反应工作液B，混匀后，标记为染色工作液，置于冰槽里，避免光照。然后进行下列操作。 1． 取出待测的10微米厚的冰冻组织切片 2． 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个样品表面 3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A） 4． 小心加上200微升 反应工作液A，铺满整个切片样品表面 5． 放进37℃培养箱里孵育30分钟，避免光照 6． 小心移去切片上的反应工作液A（注意：此为细胞色素C氧化酶染色） 7． 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A） 9． 重复实验步骤7至8二次 10． 小心加上200微升 染色工作液，铺满整个切片样品表面 11． 放进37℃培养箱里孵育15分钟，避免光照 12． 小心移去切片上的染色工作液（注意：此为琥珀酸脱氢酶染色） 13． 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 14． 小心移去切片上的清理液（Reagent A） 15． 重复实验步骤13至14二次 16． 小心加上200微升固着液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面 17． 室温下孵育15分钟 18． 小心移去切片上的固着液（Reagent F） 19． 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 20． 小心移去切片上的清理液（Reagent A） 21． 重复实验步骤19至20二次 22． 放上盖玻片或封片（中性树脂） 23． 即刻在光学显微镜下观察和计数： 单纯表达细胞色素氧化酶活性的组织细胞，呈现棕色单纯表达琥珀酸脱氢酶活性的组织细胞，呈现蓝色
注意事项 1． 本产品为20次操作 2． 建议使用异戊烷（isopentane）快速冷冻组织，避免切片冰晶形成 3． 冰冻切片不宜固定和包埋处理 4． 操作时，须戴手套 5． 染色液和反应液避免反复冻融 6． 工作液不宜久存，1周内使用为佳 7． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干 8． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面 9． 整个操作，在避光状态下进行 10． 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 11． 样品染色后保存，避免光照 12． 细胞色素C氧化酶和琥珀酸脱氢酶双酶双酶染色参考图像：
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