名称 | 规格 | Storage |
Trypsin Solution(1%) | 100ml | -20℃ |
使用说明书 | 1 份 |
自备材料:
1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量TrypsinSolution,略盖过细胞即可,室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,此时吸除胰酶细胞消化液,加入含血清的充分细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入Trypsin Solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来,1000~2000g 离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的成分培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 Trypsin Solution(1%)过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、Trypsin Solution(1%)消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。